Técnica Molecular Epigenómica 

                        

Los niveles de metilación anormales de ADD1, ACE y AGTR1 se asociaron con la patogenia de la hipertensión. La cistationina β-sintasa (CBS) es un homotetrámero citosólico, una enzima clave involucrada en el metabolismo de la homocisteína plasmática (Hcy) que convierte principalmente la Hcy y la serina en cisteína. Un estudio de la población estadounidense demostró que el gen CBS estaba relacionado con niveles anormales de Hcy. Los niveles bajos del gen CBS conducen a la hiperhomocisteinemia, lo que indica sus efectos sobre la hipertensión y el accidente cerebrovascular.

Los resultados revelaron que la hipermetilación del promotor de CBS era un factor de riesgo independiente para la hipertensión, especialmente en los hombres, debido  a que la testosterona tiene un impacto distinto en los niveles de enzimas de la CBS renal.

Referencia Bibliográfica

Wang C, Xu G. CBS promoter hypermethylation increases the risk of hypertension and stroke. PUBMED. [Internet]. 2019.  [ Citado 30 de noviembre del 2019].Obtenido de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30916171

Perfil de expresión de microarrays y análisis de ontología génica de ARN largos no codificantes en ratas hipertensas espontáneamente y sus posibles funciones en la patogénesis de la hipertensión.

La corteza renal ipsilateral se obtuvo de ratas SHR y WKY de 15 semanas de edad cuyas presiones sanguíneas habían sido monitoreadas. El ARN total se extrajo usando TRIzol, y los lncRNA y los ARN mensajeros se perfilaron por microarrays y se validaron usando una reacción en cadena de polimerasa de transcripción inversa cuantitativa fluorescente.

El análisis de microarrays demostró que 145 lncRNA se expresaron diferencialmente entre SHR y ratas WKY. El análisis de las vías GO y KEGG indicó que estos lncRNA están involucrados en numerosos procesos biológicos. Por lo tanto, los lncRNA pueden contribuir a la patogénesis de la hipertensión.

Referencia Bibliográfica

Lianglei Hou, Zhenhao Lin. Microarray expression profiling and gene ontology analysis of long non-coding RNAs in spontaneously hypertensive rats and their potential roles in the pathogenesis of hypertension. [Internet]. 2015. [citado el 22 de noviembre del 2019]. Obtenido de: https://www.spandidos-publications.com/mmr/13/1/295

Perfil de expresión de microarrays y análisis de ontología génica de ARN largos no codificantes en ratas hipertensas espontáneamente y sus posibles funciones en la patogénesis de la hipertensión.

El análisis de microarrays demostró que 145 lncRNA se expresaron diferencialmente entre SHR y ratas WKY. El análisis de las vías GO y KEGG indicó que estos lncRNA están involucrados en numerosos procesos biológicos. Por lo tanto, los lncRNA pueden contribuir a la patogénesis de la hipertensión.

La corteza renal ipsilateral se obtuvo de ratas SHR y WKY de 15 semanas de edad cuyas presiones sanguíneas habían sido monitoreadas. El ARN total se extrajo usando TRIzol, y los lncRNA y los ARN mensajeros se perfilaron por microarrays y se validaron usando una reacción en cadena de polimerasa de transcripción inversa cuantitativa fluorescente.

Referencia Bibliográfica

Lianglei Hou, Zhenhao Lin. Microarray expression profiling and gene ontology analysis of long non-coding RNAs in spontaneously hypertensive rats and their potential roles in the pathogenesis of hypertension. [Internet]. 2015. [citado el 22 de noviembre del 2019]. Obtenido de: https://www.spandidos-publications.com/mmr/13/1/295 

Tema: Asociación de polimorfismos del gen NOS3 con hipertensión esencial en pacientes sudaneses: un estudio de casos y controles

Objetivo: Investigar la asociación entre los polimorfismos (rs1799983 en el exón 7 (que codifica Glu298Asp), una repetición en tándem de número variable (VNTR) en el intrón 4 y rs2070744 (T-786C) en la región promotora)  en el gen NOS3 e Hipertensión Arterial en pacientes sudaneses.

Tipo de muestra biológica: Sangre venosa (5 ml) de cada sujeto a investigar.

Tipo de ácido nucleico: ADN genómico utilizando un kit de sangre Qiagen Gentra.

Gen o secuencia a amplificar: es el gen NOS3 (que codifica a la enzima óxido nítrico sintasa endotelial), y los productos de amplificación resultantes se incubaron con las enzimas de restricción, BanII y Mbo I para el SNP rs1799983 y Msp I para el polimorfismo rs2074744.

Tipo de PCR: PCR-RLFP (Reacción en cadena de la polimerasa con polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restricción)

Pasos:

1. Desnaturalización

2. Hibridación

3. Extensón

Visualización: los productos de PCR se visualizaron mediante electroforesis en gel de agarosa, y las muestras con diferentes longitudes se limpiaron para la secuenciación sanger.

Mediante la técnica de la PCR se ha estudiado los polimorfismos en el gen NOS3 y se ha demostrado que existen tres polimorfismos que incluyen la susceptibilidad genética y se asocia con hipertensión.

Referencia Bibliográfica:

Gamil Sahar. Association of NOS3 gene polymorphisms with essential hipertension in Sudanese patienrs: a case control study. Pubmed. [Internet].2017.[Citado 16 de noviembre 2019]. Obtenido de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5683550/

Los pacientes que tienen pistas clínicas que sugieren la posible presencia de hipertensión secundaria deben someterse a una evaluación extensa. La estrategia de tratamiento más efectiva a menudo es la que se centra en el mecanismo específico subyacente a la hipertensión. Es importante conocer las pistas clínicas que sugieren hipertensión secundaria. También se debe revisar losmétodos de prueba para la hipertensión renovascular y el tratamiento de laestenosis de la arteria renal aterosclerótica unilateral y bilateral.

La prevalencia de estenosis de la arteria renal en pacientes de alto riesgo con hipertensión severa o refractaria fue del 27 al 45 por ciento en pacientes blancos, en comparación con el 8 a 19 por ciento en pacientes negros.

Referencias Bibliográficas:

Textor S. Evaluation of secondary hypertension [Internet]. Www-uptodate-com.bibliotecavirtual.udla.edu.ec. 2019 [citado 9 Noviembre 2019]. Recuperado de: https://www-uptodate-com.bibliotecavirtual.udla.edu.ec/contents/evaluation-of-secondary-hypertension?search=screening%20hypertension%20secondary&source=search_result&selectedTitle=1~6&usage_type=default&display_rank=1

Figura 1. Impacto de la epigenética en la evolución humana.

La alteración del genoma iniciará una cadena de procesos epigenéticos tales como: la metilación del ADN, la modificación de histonas y el microARNs.

La metilación del ADN, consiste en la unión de grupos metilos a bases de citosinas, este grupo metilo “sirve como faro, el cual indica que el segmento de ADN debe ser silenciado”. Las histonas que forman la estructura de la cromatina y que se encargan de enredar y desenredar el ADN son el blanco de otro mecanismo epigenético que les agrega distintos tipos de moléculas para modificar su comportamiento. Los miARN actúan en el silenciamiento de determinados genes por medio de la interrupción de la traducción del ADN complementario. (1)

Referencia Bibliográfica

González D, Riveros K, Hanlly Velásquez ; MÁS ALLÁ DEL GENOMA EN LA HIPERTENSIÓN [Internet]. [citado 1 de noviembre de 2019]. Disponible en: https://s3.amazonaws.com/academia.edu.documents/54285486/ARTICULO-GENETICA_FINAL.pdf?response-content-disposition=inline%3B%20filename%3DARTICULO_GENETICA_FINAL.pdf&X-Amz-Algorithm=AWS4-HMAC-SHA256&X-Amz-Credential=AKIAIWOWYYGZ2Y53UL3A%2F20191103%2Fus-east-1%2Fs3%2Faws4_request&X-Amz-Date=20191103T021502Z&X-Amz-Expires=3600&X-Amz-SignedHeaders=host&X-Amz-Signature=058a30e292c8f5db8717716555fd0b9b5f9629cb519c56542c2a69d2b4e8489c

Friso S e. Epigenetics and arterial hypertension: the challenge of emerging evidence. - PubMed - NCBI [Internet]. Ncbi.nlm.nih.gov. 2019 [cited 1 November 2019]. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25035152