Tema: Terapia Epigenetica para el tratamiento de la hipertrofia cardíaca y la fibrosis inducidas por hipertensión

Mecanismo epigenómico tratado: Inhibición de la metilación del ADN con 5-azacitidina

Como se lo hizo: Las HCF con ADN con 5-azacitidina fueron cultivadas y se trataron durante 8 días con 5 ng / ml de Factor de crecimiento transformante beta 1 (TGFβ1). El aislamiento de ARN de las células HCF y H9c2 se logró utilizando el kit NucleoSpin RNA II.

La extracción de ARN se realizó utilizando un kit RNeasy Mini de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Qiagen). Los lisados ​​de proteínas de células enteras se generaron usando RIPA Lysis Buffer (Millipore) con un cóctel inhibidor de proteasa (Roche). Las concentraciones de proteínas se determinaron con un BCAKit de ensayo de proteínas (Pierce). Las ratas Wistar Kyoto (WKY) se compraron de Charles River de 10Semanas de edad y recibieron una inyección intraperitoneal.

Resultados: Estos hallazgos sugieren un papel para las modificaciones epigenéticas que contribuyen a los cambios profibróticos e hipertróficos evidentes durante la progresión de la enfermedad. La intervención terapéutica con 5-aza demostró efectos favorables destacando el uso potencial de este modificador epigenético como una opción de tratamiento para las patologías cardíacas asociadas con hipertrofia y fibrosis.

Referencia Bibliográfica: https://journals.sagepub.com/doi/abs/10.1177/1074248415591698?rfr_dat=cr_pub%3Dpubmed&url_ver=Z39.88-2003&rfr_id=ori%3Arid%3Acrossref.org&journalCode=cpta

Tipo de Edición = In vivo / Germinal 

Dirigido hacia = 3 genes críticos para la fisiología cardíaca, Myh6 , Sav1 y Tbx20

Dirigido por = ARN+proteínas basada en CRISPR / Cas9

Órgano a tratar = Corazón (cardiomiocitos) 

Vía de Administración = Inyección intraperitoneal de vectores de AAV en ratones neonatales y adultos

Resultados a corto, mediano y largo plazo =  Los resultados indican que el efecto de la edición postnatal del gen cardíaco basado en CRISPR / Cas9 usando el serotipo 9 del virus adenoasociado para administrar un solo ARN guía corto depende del objetivo. Demostraron un patrón de mosaico de disrupción génica, que dificulta la aplicación de la tecnología para estudiar la función génica. Se requieren más estudios para ampliar la versatilidad de CRISPR / Cas9 como una herramienta robusta para estudiar nuevas funciones de genes cardíacos in vivo.

Referencia Bibliográfica: https://www.ahajournals.org/doi/full/10.1161/CIRCRESAHA.116.310370?url_ver=Z39.88-2003&rfr_id=ori:rid:crossref.org&rfr_dat=cr_pub%3dpubmed

• Otra artículo de Interés relacionado al tema: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4815204/

El objetivo fue investigar los cambios histológicos hipertensivos del ventrículo izquierdo y evaluar la efectividad de la terapia con células madre mesenquimales derivadas de médula ósea (MSC) en el tratamiento de la miocardiopatía hipertensiva . Se asignaron ratas albinas machos adultas a dos grupos: grupo I ( control ), grupo II (experimental) subdividido en subgrupo IIa (hipertensivo) y subgrupo IIb ( terapia con células madre ). Los ventrículos izquierdos (LV) se procesaron para microscopía de luz y electrónica . El tricromo de Mallory y la inmunotinción para caspasa-3 y desmina se llevaron a cabo. La hipertensión causó cambios histológicos e inmunohistoquímicos en el ventrículo izquierdo que habían sido mejorados efectivamente por la terapia con MSC .

Referencia Bibliográfica

Khater NA. Selim SA. Samia A. therapeutic effect of mesenchymal stem cells on experimentally induced hypertensive cardiomyopathy in adult albino rats.BVS [Internet] 2017. Disponible en: http://pesquisa.bvsalud.org/portal/resource/pt/mdl-28029272

POTENCIAL ANTIHIPERTENSIVO DE BIOAMARANTINA RECOMBINANTE EXPRESADA EN HOJAS DE TABACO TRANSGÉNICO

La amarantina, principal proteína de reserva del grano de amaranto, cuyas excelentes cualidades nutricionales y su gran plasticidad para ser modificada a través de ingeniería de proteínas han sido demostradas en numerosos estudios, fue recientemente modificada incorporándole en la estructura primaria, de su subunidad ácida, una secuencia repetitiva del péptido bioactivo VY, cuya capacidad de inhibición de la principal proteína de regulación de la presión arterial (ECA), ha sido demostrada; tras esta modificación, esta proteína se denominó "bioamarantina".

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la posibilidad de expresar la bioamarantina, una proteína de reserva de semilla, en el tejido foliar de un sistema vegetal modelo y, al mismo tiempo, determinar si los extractos obtenidos de hojas transformadas expresando bioamarantina recombinante poseen actividad antihipertensiva in vitro.

Se transformaron hojas de tabaco variedad Xanthi-nc, mediante Agrobacterium tumefaciens, con un vector de transformación vegetal conteniendo el cDNA de bioamarantina fusionada a una señal peptídica de retención al retículo endoplásmico (KDEL) y se analizó su expresión transitoria en hoja. Un extracto proteínico de hojas transformadas fue obtenido e hidrolizado con tripsina y quimotripsina; los péptidos generados, fueron separados por ultrafiltración para finalmente ser sometidos a los ensayos in vitro de inhibición de ECA.

Ventajas de los Transgénicos
Alimentos con mejores y más cantidad de nutrientes.
Mejor adaptación de las plantas a condiciones de vida más deplorables.
Aumento en la producción de los alimentos con un sustancial ahorro de recursos.
Aceleración en el crecimiento de las plantas y animales.
Capacidad de los alimentos para utilizarse como medicamentos o vacunas para la prevención y el tratamiento de enfermedades. 

      Desventajas de los Transgénicos
      Incremento de sustancias tóxicas en el ambiente.
      Perdida de la biodiversidad.
      Contaminación del suelo.
     Resistencia de los insectos y hierbas indeseadas ante medicamentos desarrollados para su contención.
     Posibles intoxicaciones debido a alergias o intolerancia a los alimentos procesados.

     Referencias Bibliográficas

     German L. Silva R. Potencial antihipertensivo de bioamarantina recombinante expresada en hojas de tabaco transgénico. [Internet] 2014 [citado 22 diciembre 2019] Disponible en: German L. Silva R. Potencial antihipertensivo de bioamarantina recombinante expresada en hojas de tabaco transgénico. [Internet] 2014 [citado 22 diciembre 2019] Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/228688612_POTENCIAL_ANTIHIPERTENSIVO_DE_BIOAMARANTINA_RECOMBINANTE_EXPRESADA_EN_HOJAS_DE_TABACO_TRANSGENICO

  VENTAJAS Y DESVENTAJAS DEL USO DE TRANSGENICOS - PRODUCTOS TRASNGÉNICOS EP [Internet]. Sites.google.com. 2019 [citado 22 Diciembre 2019]. Obtenido de: https://sites.google.com/site/gruposetnicosdelecuadorep/home/ventajas-y-desventajas-del-uso-de-transgenicos

  

Tratamiento eficaz de la hipertensión por péptido inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina recombinante Lactobacillus plantarum que expresa

Los péptidos inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (ACEIP), que están hechos de proteína de marco de atún (TFP) y proteína de marco de suela de aleta amarilla (YFP), se han utilizado previamente para tratar la hipertensión.

Sin embargo, la producción de estos péptidos cortos generalmente depende de la hidrólisis enzimática, lo que resulta en una mezcla digerida que dificulta la purificación de los ACEIP. Aunque se ha informado que los ACEIP podrían producirse en cepas de Escherichia coli recombinantes , no se ha demostrado el uso de bacterias del ácido láctico en la producción de ACEIP.

Estos resultados demostraron la efectividad y seguridad de RLP en el tratamiento de la hipertensión.

Referencia bibliográfica:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4687296/

Es un tipo de ADN formado por la unión de dos moléculas de diferente origen. La transformación genética es un proceso mediante el cual la célula capta moléculas de ADN libre y las mantiene en su interior en forma de un replicón extra cromosómico o las incorpora a su genoma por recombinación homóloga. El ADN se recombina de manera natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral. Enzimas llamadas recombinasas catalizan las reacciones de recombinación natural.

En biología molecular, recombinación también se refiere a recombinación artificial y deliberada de piezas de ADN distintas, a menudo de diferentes organismos, creando el ADN recombinante.

Referencia bibliográfica

Salcedo LM. Recombinación genética | Recombinación genética | Mutación [Internet]. [citado 2019 Dic 9]. Obtenido de: https://es.scribd.com/doc/70708591/Recombinacion-genetica

Técnica Molecular Epigenómica 

                        

Los niveles de metilación anormales de ADD1, ACE y AGTR1 se asociaron con la patogenia de la hipertensión. La cistationina β-sintasa (CBS) es un homotetrámero citosólico, una enzima clave involucrada en el metabolismo de la homocisteína plasmática (Hcy) que convierte principalmente la Hcy y la serina en cisteína. Un estudio de la población estadounidense demostró que el gen CBS estaba relacionado con niveles anormales de Hcy. Los niveles bajos del gen CBS conducen a la hiperhomocisteinemia, lo que indica sus efectos sobre la hipertensión y el accidente cerebrovascular.

Los resultados revelaron que la hipermetilación del promotor de CBS era un factor de riesgo independiente para la hipertensión, especialmente en los hombres, debido  a que la testosterona tiene un impacto distinto en los niveles de enzimas de la CBS renal.

Referencia Bibliográfica

Wang C, Xu G. CBS promoter hypermethylation increases the risk of hypertension and stroke. PUBMED. [Internet]. 2019.  [ Citado 30 de noviembre del 2019].Obtenido de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30916171